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四口蹄疫3（第3页）

心肌细胞变性、坏死、溶解，其释放出有毒分解产物而使患病动物死亡。

【诊断】

根据流行病学、临床症状和病理剖检特点可做出初步诊断，确诊需要进行实验室诊断。

1.病毒分离鉴定

（1）病料采集：

通常采集新鲜的水疱皮或水疱液，采后加入等量pH7.6含10%胎牛血清的组织培养液；

也可从刚发过病的动物采集病料，一般采集血液或用食道探杯刮取咽喉-食道分泌物；

死亡动物则可采集淋巴结、骨髓、甲状腺或心肌等材料作为病料。

（2）分离鉴定：

病料制成20%的组织悬液，接种细胞培养物、未断乳乳鼠等实验动物。

口蹄疫病毒可在猪肾细胞、乳仓鼠肾细胞等细胞系中增殖并产生细胞病变，可致死7日龄内乳鼠，必要时可进一步通过血清学试验、聚合酶链式反应等检测、鉴定病毒。

2.分子生物学诊断

随着分子生物学技术的迅猛发展，口蹄疫的诊断技术也得到了快速发展，主要有核酸杂交、RT-PCR等技术，使口蹄疫的诊断更加简便、快捷、特异和敏感。

3.血清学试验

血清学试验常用于口蹄疫病毒毒型的鉴定，以便依据流行毒株的血清型选用同型口蹄疫疫苗，进行紧急免疫接种。

常用的血清学试验有补体结合试验（CFT）、（乳鼠病毒）中和试验（NT）、免疫扩散沉淀试验（IDPT）、荧光抗体技术等。

近年来，OIE推荐的间接夹心ELISA在国际贸易中广泛使用，在数小时内可获得试验结果。

因为免疫接种动物3ABC抗体呈阴性，而感染动物3ABC抗体则呈阳性，因此，可通过检测血清中口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC抗体，区分感染动物和免疫接种动物。

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4.动物接种试验

一般选2～7日龄纯系乳小鼠，于颈背部皮下接种病毒感染液

0.2mL。

接种小鼠通常于20～30h出现典型的口蹄疫症状，发病乳小鼠运动不灵活，用镊子夹住尾巴或四肢，常可发现其已失去知觉。

随后四肢麻痹，呼吸迫促，最终死亡。

采集濒死期或新死乳小鼠的骨骼肌，研磨制成10%的病料悬液，供传代接种和鉴定用。