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第7章 家禽的传染病 传染性支气管炎2（第2页）

1、病毒分离

（1）取样：

气管（主要靶器官、发病1周内采样、气管试子或取气管组织）泄殖腔棉拭子或盲肠扁桃体（感染持续1周以上的）作为病料。

初期在呼吸道，快速清除，进入非呼吸器官（如肾脏）持续存在。

（2）鸡胚接种：

9~11日龄，初代侏儒胚，传代规律性死亡（至少盲传4代均未出现病变才能判为阴性）。

（3）气管环培养：18~20日龄鸡胚，气管环旋转培养，其感染IBV后1~4d纤毛运动停止，上皮细胞脱落。

（4）动物接种：传代后的鸡胚液体接种7日龄内雏鸡，18~36小时后可出现气管罗音。

2、干扰试验

（1）IBV在鸡胚中可干扰新城疫Ⅱ系疫苗血凝素的产生；

（2）9~11日龄鸡胚经尿囊腔接种待检鸡胚液；

（3）10~18h后接种NDV-B1株（Ⅱ系疫苗株）；

（4）孵化36~48h后检测鸡胚液HA；

（5）结果：试验组鸡胚液有50%以上HA滴度在1:20以下；对照组90%以上鸡胚液HA滴度在1:40以上。

3、血清学试验

已报道用得较多的有：

（1）琼脂扩散沉淀法（常用于检测抗体，可能出现假阴性）

（2）ELISA（正常IB疫苗其ELISA抗体水平通常在2000～之间。

抗体在~甚至以上的鸡群，提示存在感染）、免疫荧光（IF）、免疫扩散（用于检测群特异性抗体）

（3）病毒中和试验（已知病毒检查血清抗体，病初和2~3周双份血清，第二次血样的中和抗体滴度高于第一次血样4倍以上）血凝抑制试验→两者用于确定血清型

七、防制

1、饲养管理：密度、通风、消毒、药物预防。

2、免疫接种

（1）对IB的免疫防控要采用弱毒疫苗与灭活疫苗联合使用的原则。