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直接检测A1病毒抗原的方法有抗原捕捉ELISA、荧光抗体技术、免疫酶组化法等;直接检测AI病毒基因的方法有标记核酸探针原位杂交法、RT-PCR法等。
A1病毒的分离鉴定首先是测定分离的病毒是否有血凝性;其次用血凝抑制试验以排除其他血凝性病毒的可能性;然后用对型特异的NP或M蛋白的琼脂扩散试验等方法确定是否为A型流感病毒;最后确定HA和NA的亚型。
OIE判断HPATV的标准是:
含流感病毒尿囊液,做1:10稀释,静脉内接种8只4~8周龄易感鸡,每只0.2mL,如在10d内死亡6只或以上,则为HPAIV,死亡5只或以下则为LPAIV;
或用上述稀释尿囊液接种10只4~8周龄易感鸡,每只0.1mL,观察10d,计算静脉内致病指数(IVPI),如大于1.2则为HPAIV,如小于1.2则为LPAIV。
对于上述动物试验中确定为LPAIV所有的H5和H7亚型病毒则必须测定血凝素裂解部位的氨基酸顺序,如果相似于其他的HPAIV,存在多个碱性氨基酸序列,则该受检病毒被视为高致病性的。
在临床上应注意将本病与新城疫、传染性法氏囊病和传染性喉气管炎相区分。
【防控】
对于必须报告的禽流感尤其是HPNAI,首先依靠严格的生物安全措施预防;如不慎被引进则应在第一时间向兽医行政管理部门报告,果断采取隔离封锁、扑杀销毁、环境消毒等措施,防止疫情扩散。
如果NAI疫情扩大到较大的范围,而且持续相当长的时间,变为地方流行性,这时已很难用隔离封锁和扑杀销毁的措施来消灭疫点,使用疫苗是可供选择的控制方法之一,但是作为整个控制策略的一部分,而不应完全依赖疫苗乃至乱用疫苗。
H9亚型和H5亚型的禽流感灭活疫苗对同亚型AIV引起的疾病均有很好的保护作用,但必须考虑禽流感病毒,特别是H5N1亚型病毒,在免疫压力下抗原漂移的速度快,疫苗对不同流行毒株的保护率存在较大差异。
对于NAI,除加强生物安全措施和使用疫苗以控制疫情和减少经济损失外,还应制定地区性和全国性控制和根除的中长期规划,以期最终消灭它,达到不免疫无病状态。
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