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二疫情报告和诊断2(第3页)

能引起变态反应的物质(病原体或其产物或抽提物)称为变应原,如结核菌素、鼻疽菌素等,将其注入患病动物时,可引起局部或全身反应,故可用于传染病的诊断。

4.分子生物学诊断

分子生物学诊断又称为基因诊断。

主要是针对不同病原微生物所具有的特异性核酸序列和结构进行测定。

自1976年以来,基因诊断方法取得巨大进展。

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建立了DNA限制性内切酶图谱分析、核酸电泳图谱分析(如鸡传染性法氏囊病病毒、呼肠孤病毒等都有特征性电泳图谱条带)、寡核苷酸指纹图、核酸探针(Northern杂交、Southerm杂交、原位杂交、斑点杂交等)、聚合醇链反应(polymerasechainreaction,PCR)以及新近几年发展起来的DNA芯片(DNAchip)技术等。

在传染病诊断方面,具有代表性的技术主要有三大类:PCR技术、核酸探针和DNA芯片技术。

(1)PCR技术:

又称为体外基因扩增技术,诞生于1985年,由美国PE-cetus公司Mullis等人发明,1987年得到美国专利局的专利授权。

它不仅在疾病诊断领域而且在整个生命科学领域都是应用最广泛、最受青睐的技术。

PCR技术用于传染病的诊断主要是检测病原核酸,不仅可以检测活的病原体,而且还可检出已灭活的病原体,甚至是存放多年的病理标本,只要病原体的核酸未降解。

因此,当由于各种原因无法进行病原分离与鉴定时(如人工方法不能培养或极端危险不宜培养),该技术将发挥巨大作用,既克服了技术难题,又安全可靠。

传染病的病原体主要有真核生物、原核生物和非细胞型生物(病毒)三大类。

每类病原体都有其特异性的核酸序列。

检测出特异性核酸就能确定致病的微生物,从而确诊是哪种传染病。

PCR技术具有高度敏感性和特异性,可从10?个细胞中检出一个被病毒感染的细胞,可将同一病原的不同毒株或菌株区分开来,这是一般诊断方法难以办到的。

同时,PCR方法简便、快速,目前已广泛应用到几乎所有传染病的检测。

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